服務(wù)介紹：

    還原糖檢測試劑盒(斐林比色法)主要由酒石酸鈉鉀、硫酸銅等組成，其測定原理是還原糖具有醛基和酮基，在堿性溶液中煮沸能把斐林試劑中的Cu2+還原成Cu+，使藍色的斐林試劑脫色，脫色程度與溶液中還原糖含量成正比，在590nm下可用比色法測定吸光度，查標準曲線即可計算出樣品中還原糖的含量，主要用于含淀粉食品、酒精飲料、碳酸飲料、肉制品、蜜餞等食品和植物等樣品中還原糖的定量檢測，總糖的含量也可以測定，但需要提前水解后才能檢測，也可用于還原糖的定性試驗。

實驗流程：

1、配置斐林試劑。

2、配置pH中和液(1×)。

3、樣品中還原糖的提?。?/span>

1)固體樣品(如含淀粉食品、植物樣品等)：稱取粉碎或混勻后的試樣10~20g（精確到0.01g），置于250ml容量瓶，當體積接近150ml時滴加1~3滴甲基紅指示劑，如呈紅色可用pH中和液調(diào)至微黃色；若用風(fēng)干樣品，可稱取3g直接加入容量瓶，加入少量水濕潤后再加水至150ml左右加入指示劑和中和液；將容量瓶置于80℃的恒溫水浴中保溫30min，期間搖動數(shù)次，以便將還原糖充分提取出來。

2)酒精飲料：稱取混勻后的試樣100g(精確到0.1g），置于蒸發(fā)皿上，滴加1~3滴甲基紅指示劑，用pH中和液調(diào)至微黃色，在水浴上蒸發(fā)至原體積的1/4后，移入250ml容量瓶，置于80℃的恒溫水浴中保溫30min，期間搖動數(shù)次。

3)碳酸飲料：稱取混勻后的試樣100g(精確到0.1g），置于蒸發(fā)皿上，在水浴上微微攪拌除去二氧化碳后，移入250容量瓶，用水洗滌蒸發(fā)皿并入容量瓶，加水至刻度，混勻后備用。

4)總糖的水解和提?。?/span>稱取植物樣品0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約3ml勻漿，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶，用12ml蒸餾水沖洗研磨器2~3次，沖洗液也轉(zhuǎn)移至燒瓶中，向三角燒瓶中加入10ml  6M鹽酸溶液，搖勻，煮沸30min，并不時攪拌；取2滴加于小離心管，再滴加1滴碘液，檢查水解是否完全，如已經(jīng)水解完全，則不顯示藍色；水解完畢后冷卻至室溫，滴加6M氫氧化鈉溶液，使溶液pH接近中性；含蛋白質(zhì)較多的樣品參考上述方法，濾液或上清液用蒸餾水定容至100ml，混勻，取10ml，用蒸餾水定容至100ml，搖勻備用。

3、制作還原糖標準曲線：按下表設(shè)置空白管(0號)、梯度標準管(1~6號)，按順序依次加入。

將各管混勻后，用沸水浴加熱15min，冷水或自來水冷卻，2500r/min離心5~10min，取上清，1cm比色皿，空白管調(diào)零，用分光光度計測590nm的吸光度值，以各標準管吸光度為縱坐標、對應(yīng)葡萄糖含量為橫坐標，繪制標準曲線。

4、樣品還原糖的測定：吸取準備好的還原糖提取液3ml，加入2ml斐林試劑，混勻，沸水浴加熱15min，冷卻、離心、取上清、測定等操作同標準曲線，空白管調(diào)零后用樣品管的吸光度值帶入回歸方程即可計算出樣品中還原糖的含量。

 實驗結(jié)果：全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

鑒定結(jié)果：

還原性糖(如核糖、葡萄糖、果糖等)呈磚紅色沉淀，非還原性糖(蔗糖、淀粉等)無顏色變化。

送樣運輸要求：

植物樣本干冰運輸，食品樣本具體以食物存儲方式運輸。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！