服務(wù)介紹：

    葡萄糖(Glucose, Dextrose，Glu)又稱玉米葡糖，簡稱葡糖，化學(xué)式C6H12O6，分子量為180.16，是自然界分布最廣、最重要的一種單糖，屬于多羥基醛。用酶學(xué)方法測定葡萄糖是生化檢測中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法，上述酶學(xué)法特點是：1、靈敏度、準確度、精密度均高；2、使用溫和的反應(yīng)條件；3、操作簡便；4、適用于自動分析儀，測定葡萄糖亦可通過鄰甲苯胺法、苯胺法、聯(lián)苯胺法等實現(xiàn)。

實驗流程：

樣本處理：

①血清、血漿、腦脊液樣品：從待測樣品中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血，直接測定，如超過線性范圍(30mmol/L)，用生理鹽水或PBS稀釋后測定。

②細胞樣品：

a.取適量的細胞(一般推薦>10⁶以上)，1000g離心10min，棄上清，留取沉淀。

b.用PBS或生理鹽水清洗1~2次，1000g離心10min，棄上清，留取沉淀。

c.加入200~300μl的PBS或生理鹽水勻漿，冰浴條件下超聲破碎細胞，功率300W，每次3~5s，間隔30s，重復(fù)3~5次；亦可手動勻漿，制備好的勻漿液不可離心；亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min，制備好的裂解液不可離心。

③組織樣品：準確稱取適量組織樣品，按質(zhì)量(g)：生理鹽水或PBS(ml)=1：9的比例，加入生理鹽水或PBS，冰浴條件下手動或機械勻漿，2500~3000g離心10min，取上清。

Glu測定：

   ①各種儀器按上表依次加入試劑。

②充分混勻, 37℃水浴中孵育15min。

③立即用相應(yīng)儀器測定505nm處吸光度，以空白孔(管)調(diào)零，讀取標(biāo)準孔(管)、測定孔(管)的吸光度，分別記為A_{標(biāo)準}、A_測定。

機器參數(shù)：

實驗結(jié)果：全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求：

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜（GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測;或進行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞：將細胞用PBS沖洗2次后，用細胞刮將細胞小心刮下來，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

懸浮細胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細胞沉淀，干冰運輸。

細胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實驗，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！