服務(wù)介紹：

氧化型谷胱甘肽(GSSG)檢測試劑盒(GSSG Assay Kit)是一種簡單易行的GSSG檢測的試劑盒，其檢測原理是谷胱甘肽還原酶(GR)把GSSG還原成GSH，由GSSG還原成的GSH和樣品本身含有的GSH都與發(fā)色底物DTNB反應(yīng)，生成黃色的TNB和GSSG，總谷胱甘肽(T-GSH，GSSG+GSH)就相當(dāng)于一個呈色的限速反應(yīng)， T-GSH含量決定了黃色含量，用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ惹宄龢悠分械腉SH，然后利用GR將GSSG還原為GSH，通過分光光度計檢測412nm處吸光度，帶入回歸方程就可以計算出GSSG的量。該試劑盒可用于測定血漿、血清、植物或動物組織、細(xì)胞等樣品中氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量，亦可檢測總谷胱甘肽(T-GSH)含量。該試劑盒僅用于科研，不用于臨床診斷或其他用途。

實驗結(jié)果展示：

實驗流程：

試劑盒：

1、樣本接收：植物組織、動物組織、紅細(xì)胞、血漿、細(xì)胞

2、實驗步驟：

(1)工作試劑的配制：取適量 GSSG標(biāo)準(zhǔn)加入ddH2O中配制GSSG標(biāo)準(zhǔn)儲存液。在GSH 清除劑中加入 70%乙醇，配成GSH清除劑工作液。在NADPH中加入 ddH2O，配成NADPH工作液。在DTNB中加入適量DMSO，溶解并混勻，即為DTNB儲存液。按GR：GSSG assay buffer =1:49的比例混合，即為GR工作液。把GSSG標(biāo)準(zhǔn)儲存液(10mM)用蛋白清除試劑稀釋成50μM標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后依次稀釋成GSSH標(biāo)準(zhǔn)溶液。

(2)按照說明書設(shè)置的表格依次加樣。

(3)全自動生化儀自動測定。

實驗結(jié)果：全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求：

以下所有樣本必須盡量新鮮!

1.動植物組織樣本(干冰運輸)

準(zhǔn)確稱取動物組織重量，按重量(mg): 體積(L)=1:9 的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦 0.86% 或 0.9% 的生理水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500-3000r/min，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測定。

2.血清樣本(干冰運輸)

全血標(biāo)本請于室溫放置2h或4℃過夜后于 2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于 -20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

3.血漿樣本(干冰運輸)

可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30min內(nèi)于2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

4.細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，接著將培養(yǎng)液3000r/min離心 10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000r/min離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃3000r/min離心15min取上清，上清立即用于實驗，或分裝后于-20或-80保存。避免反復(fù)凍融。

5.全血樣本(4℃運輸)

EDTA抗凝管取適量抗凝全血時，EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL，樣本量不可太多或太少，取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運輸，不可與冰袋直接接觸，不可猛烈撞擊?？鼓獌H用于血常規(guī)檢測，不可運輸后再離心取血漿。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！