服務(wù)介紹：

       淀粉酶(AMS)檢測(cè)試劑盒(碘-淀粉比色法)其檢測(cè)原理是血清或血漿等樣品中α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷鍵水解，產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖以及糊精等，碘液與未被水解的淀粉結(jié)合生成藍(lán)色復(fù)合物，其藍(lán)色深淺與未經(jīng)酶促反應(yīng)的空白比較，可計(jì)算出淀粉酶的活力單位，通過分光光度計(jì)檢測(cè)660nm處吸光度，可用于檢測(cè)細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿、血清、尿液等樣品中內(nèi)源性的淀粉酶活性。

實(shí)驗(yàn)流程：

1、 準(zhǔn)備樣品：

①細(xì)胞或組織樣品：取恰當(dāng)細(xì)胞或組織裂解液，如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿，低速離心取上清，-20℃凍存，用于AMS的檢測(cè)。

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備，用生理鹽水5~10倍稀釋后可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，尿液通常用生理鹽水10~20倍稀釋后直接用于測(cè)定，-20℃凍存，但為了消除樣品本身顏色的干擾，需設(shè)置加了樣品但不加底物的對(duì)照。

③高活性樣品：如果樣品中含有較高活性的AMS，可使用生理鹽水或PBS等進(jìn)行稀釋。

④樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度(mg/ml），以便于后續(xù)計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的AMS含量。

2、 AMS加樣：按照下表設(shè)置空白管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入

      3、 AMS測(cè)定：輕輕混勻，蒸餾水調(diào)零，分光光度計(jì)(比色杯光徑1cm)測(cè)定660nm處吸光度(記為A測(cè)定和A空白)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求：

1、動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量按重量(mg)：體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2、血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜（GLU檢測(cè)請(qǐng)勿全血樣本放置過夜取血清）后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

3、血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

4、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞：將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分，離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清：標(biāo)本于2-8℃，3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

 僅供科研用途，不可用于臨床診斷！